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食品加工废水微生物指标检测主要包含哪些项目和检测标准
食品加工废水的微生物指标检测是保障水环境安全和食品行业可持续发展的重要环节。通过对大肠菌群、总菌落数、粪大肠菌群、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、霉菌酵母菌、志贺氏菌等微生物项目的检测,并遵循相应标准,能有效把控废水排放对生态环境和人体健康的影响。接下来将详细介绍食品加工废水微生物指标检测的各项项目及标准。
大肠菌群包括埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属等。检测常采用多管发酵法。初发酵试验时,取废水样品接种乳糖胆盐发酵管,于36℃±1℃培养48h±2h,产酸产气者进行平板分离。将培养物接种伊红美蓝琼脂平板,36℃±1℃培养18h - 24h,挑选符合特征菌落革兰氏染色镜检,革兰氏阴性无芽孢杆菌再行复发酵试验,接种乳糖发酵管观察产酸产气情况。其标准方面,部分食品加工行业规定废水中大肠菌群数每100mL不得检出超标情况。
实际检测中,样品采集需具代表性,要按规范采样方法,保证所取样品能真实反映废水微生物状况。操作时无菌操作至关重要,从样品处理到接种培养各步骤需防止外界杂菌污染,否则影响检测结果准确性。而且检测所用设备和试剂有严格要求,培养基要符合标准配方,保证营养成分合适以支持大肠菌群生长区分,培养箱温度要精确控制在规定范围,保障培养环境适宜。
总菌落数是废水样品中能在固体培养基生长繁殖形成菌落的细菌总数,采用平板计数法。将废水样品梯度稀释,取合适稀释度样品液涂布营养琼脂平板,每个稀释度做三个平行样,在30℃ - 35℃恒温培养箱培养48h±2h后计数。总菌落数标准因食品加工行业而异,一些对废水排放要求高的企业规定废水中总菌落数每毫升不得超过几百个。
进行总菌落数检测时,稀释操作要准确,每步稀释需按无菌操作规范,避免引入杂菌。平板涂布要均匀,保证菌落单独生长便于准确计数。培养条件需稳定,温度、时间等因素影响菌落生长和检测结果,所用营养琼脂平板要质量合格,成分符合标准以保证细菌正常生长形成菌落。
粪大肠菌群是能在44.5℃±0.2℃发酵乳糖产酸产气的大肠菌群细菌,采用复发酵法检测。初发酵试验将废水样品接种含乳糖培养液,36℃±1℃培养24h±2h,产酸产气者转接煌绿乳糖胆盐培养液,在44.5℃±0.2℃水浴中培养24h±2h,产酸产气者再平板分离镜检。其标准较严格,部分地区规定食品加工废水中粪大肠菌群数每100mL不得超过特定数值,要严格控制其数量,因与粪便污染相关,对环境和人体健康有影响。
检测粪大肠菌群时,温度控制是关键,44.5℃±0.2℃水浴培养条件需精准把控,否则检测结果偏差。样品前处理要保证样品充分接触培养液,以确保粪大肠菌群正常生长检测。试剂和培养基质量影响检测结果,要选用符合标准的试剂和培养基。
检测金黄色葡萄球菌包括增菌、分离培养和鉴定等步骤。增菌时将废水样品接种7.5%氯化钠肉汤,36℃±1℃培养24h - 48h。分离培养时接种血琼脂平板,36℃±1℃培养24h - 48h,形成圆形、凸起等特征菌落且周围有透明溶血环。鉴定通过革兰氏染色镜检(革兰氏阳性球菌葡萄状排列)及血浆凝固酶试验等。其标准因法规要求而异,食品加工废水排放中通常规定不得检出或控制在极低水平。
检测时,7.5%氯化钠肉汤浓度要准确配制,保证金黄色葡萄球菌生长抑制其他杂菌。血琼脂平板质量要符合标准,成分和制备方法需规范,以保证金黄色葡萄球菌正常生长和溶血现象观察。血浆凝固酶试验操作要规范,确保结果准确以正确鉴定金黄色葡萄球菌。
检测沙门氏菌包括前增菌、选择性增菌、分离培养和生化鉴定等步骤。前增菌将废水样品接种缓冲蛋白胨水等培养基,36℃±1℃培养18h - 24h。选择性增菌接种四硫磺酸盐煌绿增菌液等选择性培养基继续培养。分离培养接种沙门氏菌属选择培养基,36℃±1℃培养24h - 48h,形成特定特征菌落。生化鉴定通过一系列生化试验鉴定。其标准严格,食品加工废水排放中通常不允许检出沙门氏菌,因其会引起食物中毒等健康问题。
检测时,前增菌和选择性增菌培养条件要严格控制,培养时间和温度符合要求,保证沙门氏菌充分生长分离。选择培养基成分要准确,以选择性分离沙门氏菌抑制其他杂菌。生化鉴定操作要规范,每步生化试验按标准方法进行以准确鉴定沙门氏菌。
检测霉菌和酵母菌采用平板计数法。将废水样品梯度稀释后接种虎红琼脂培养基,在25℃ - 28℃下培养5d - 7d后计数。其标准因食品加工行业不同而异,一些企业规定废水中霉菌和酵母菌总数每毫升不得超过一定数量。
检测时,虎红琼脂培养基成分要符合标准,PH值等条件适宜霉菌和酵母菌生长。培养温度和时间要严格控制,25℃ - 28℃温度范围和5d - 7d培养时间保证霉菌和酵母菌充分生长形成可计数菌落。样品稀释要准确,避免因稀释不当导致计数误差。
检测志贺氏菌包括增菌、分离培养和生化鉴定等步骤。增菌时将废水样品接种GN增菌液等培养基,36℃±1℃培养6h - 8h。分离培养接种志贺氏菌属选择培养基,36℃±1℃培养24h - 48h,形成特定特征菌落。生化鉴定通过一系列生化试验鉴定。其标准要求严格,食品加工废水排放中通常不允许检出志贺氏菌,因其会引起严重肠道传染病。
检测时,GN增菌液成分要准确配制,保证志贺氏菌良好生长。SS琼脂平板等选择培养基成分和质量要符合标准,有效分离志贺氏菌。生化鉴定操作要规范,确保准确鉴定志贺氏菌,保证检测结果准确性。
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